Bioquímica tiroidea: Estudios sobre yodinasa y tiroxidasa

Abstract

Dos preparados con actividades enzimáticas peroxidásicas fueron separados a partir de homogenados tiroideos caninos, uno capaz de peroxidar el yoduro (yodinasa) determinado espectrofotométricamente a 287.5 m¡i y el otro, usando yodotirosinas como sustrato, con actividad a 328 m/x ( tiroxidasa). Se realizaron incubaciones de preparados con actividad tiroxidásica en presencia de MIT- 131I, que luego fueron cromatografiados en papel con dos sistemas de solventes, uno metanol: acetato de amonio y otro butanol: etanol: hidróxido de amonio. Las incubaciones realizadas en presencia de H202 muestran la formación de un compuesto desconocido, D ' , que contiene radiactividad y es ninhidrino positivo. Este compuesto D' representa el 4-5% de la radiactividad total presente en el cromatograma. El mismo no aparece en las incubaciones realizadas en ausencia de H2O2. A partir de un cromatograma obtenido luego de una incubación con MIT-131I en escala preparativa, se eluyó la zona correspondiente a D', que luego se recromatografió obteniéndose una purificación parcial del desconocido. También se efectuaron desarrollos electroforéticos en gel de poliacrila -mida que se revelaron con amidoschwarz y bendicina. El preparado conteniendo la actividad tiroxidásica presenta una banda con actividad peroxidásica, aparte de la de hemoglobina.